實驗室一般都是用些什么離心機?
信息來源: 湘銳離心機 發布時間:2022-04-25 閱讀:357
實驗室離心機一般都是用于實驗分析或者樣品制備等。
其原理都是一樣的,都是利用離心力進行過濾分離或者血清分離。那么如何完成分離、濃縮機提取方法制備,
1.醫學實驗室離心技術的選擇
根據相對離心力(RCF)的上限及其主要應用,醫學實驗室常用的離心機大致可分為四類:低速離心機、通用離心機、高速離心機和超高速離心機。
1.1離心機的選擇
(1)低速離心機。Rcf≤7000g;細胞或細胞碎片的沉淀分離、過濾、滲析、親和柱凈化;大容量(4ー12l)型常用于血站或血庫實驗室。
(2)通用離心機。RCF≤30 000克;除了低速功能外,還具有核酸、蛋白質、質粒提取等一些高速功能。
(3)高速通過離心機。RCF≤100 000 g;核酸、蛋白及基因質粒進行提取;兼顧亞細胞組織結構和病毒可以分離;密度不同梯度條件下離心。PSB200實驗室使用離心機.jpg
(4)超速離心機。RCF1 050 000 g;經核酸純化的氯化銫;亞細胞結構、細胞器、病毒和脂蛋白的分離;密度梯度離心法
1.2常用離心參數
(1)離心機速度。轉子通過離心驅動系統旋轉的速度,單位為每分鐘轉數(每分鐘轉數)(r/min)。
(2)相對離心力。當一個物體在給定的角速度處作圓周運動時,其軸向運動產生離心力f=ω
2 r.但是離心力要克服垂直于它的地球引力和樣品粒子的摩擦力。
和浮力產生影響(后兩者可忽略不計),故以RCF表示,RCF=ω2 r/980,等于在離心場中作用于學生樣本進行粒子上的離心力作用相當于一個地球自身重力的倍數,單位是重力以及加速度g(1 g=980 cm/s 2),RCF1000×g則是由于重力方向加速度的1000倍。RCF的大小與離心處理速度及在離心收集容器中粒子距心軸的路徑(實際使用離心運動半徑)有關,即RCF=1.12r(RPM/1000)2,故有中國最大、平均和最小RCF之分。樣品分析粒子系統能否能夠得到發展有效方法分離技術主要問題取決于RCF,文獻研究中常需要給出自己最大RCF為離心時間條件。轉頭額定工作轉速所對應的RCF可以同時通過采用離心半徑-RCF-RPM曲線關系換算,但精確RCF值應查找生產廠轉頭參數表。
(3)沉降系數(沉降系數,S)。它是樣品粒子的一個重要的理化參數。Svedbergs值(S值=10-13s)代表相應的離心力樣品顆粒的沉降速率。不同S值的離心時間(完全沉降到容器底部)的表達式為t=1/S
常見分離生物樣本的
(4)K因子值。它反映了離心轉子的效率,它與轉子的尺寸、材料和速度有關。K值可以用來估算S值樣品顆粒的沉降時間:T=K/S,K值越小,紡絲效率越高,沉降時間越短[5]。
2醫學研究實驗室離心機的離心處理技術
根據離心力與被離心物質的相互作用,可分為差速離心和密度梯度離心。
2.1差速離心
差速離心是利用進行離心處理樣本主要組分中不同地區沉降影響系數以及粒子的沉降發展速度明顯差別(如各細胞活性組分),經一定增長速度、一定社會離心力及一定工作時間通過離心力,先后出現沉降而得到有效分離。在此研究過程中存在樣本企業往往被分離為沉淀物和上清液兩部分,其前提是待分離的兩種或數種粒子的S值的差值沒有足夠使用離心樣品S值RCF(g)RPM(r/min)細胞~10 7>200>1500細胞核4×10 6~10 7 600~800 3000
細菌,線粒體210 4~710 4 7000 7000微粒體
50~110410000~100000010000~30 000病毒,DNA10~1200~100 000~30 000 RNA4~501000000~40000000000~60 000蛋白質2~25400000000000
差速離心離心沉淀時間短,壁效應最小,且沉淀物長時間附著在管壁上
差速區離心通道長度不合適,離心通道長度短于長時區
離心時間最長,離心時間最短
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